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北京快3聚丙烯酰胺凝胶选择指导

发布时间 2020-12-12 04:25

  Invitrogen提供了大量的涵盖面广的蛋白分离预制胶,包括不同的成分,百分比浓度和格式。使用合适的胶百分比浓度,缓冲系统,上样孔格式以及胶的厚度,对于获得最好的结果非常重要。以下提供了帮助你选择适合你应用的正确凝胶的信息。

  E-PAGE™ 96 High-Throughput System是整合的、无缓冲液系统,设计用来检测和分析大量的蛋白样品,时间仅仅需要14分钟。

  NuPAGE® Novex Gels组合了完美的技术和极度的可靠性。货架期长达12个月,比其它蛋白凝胶需要的电泳时间更短,中性pH值,为大多数蛋白的分离和转移提供优良的性能。现在可以获得8个分离范围,分离绝大多数不同大小的蛋白。

  加样孔格式:17孔,15孔,12孔,10孔,9孔,5孔,1孔,2D/准备 孔或者IPG孔

  一般而言,分离分子的大小应该决定你选择丙烯酰胺的浓度。使用低百分比浓度凝胶分离较大的分子,高百分比浓度的凝胶分离较小的分子。进行等电聚焦时,这条规则例外。参看凝胶迁移图发现最适合你应用的凝胶。通常,为了达到最佳的分辨率,分子应该移动通过凝胶长度的70%。当蛋白分子量范围宽或者未知,梯度胶通常是最好的选择。

  我们提供大部分聚丙烯酰胺凝胶为9孔的格式(17孔,15孔,12孔,10孔,9孔,5孔,1孔,2D/准备 孔或者IPG孔)。一些类型的凝胶可以得到两种厚度(1.0mm和1.5mm)。如果上样量大(>30μl)时,使用较厚的凝胶(1.5mm)和较少的上样孔(5孔)更为合适。北京快3如果blotting,记住蛋白从1.0mm的凝胶中比从1.5mm的厚胶中更容易转移。表1总结了各种类型凝胶的特定和应用。使用表2确定哪一种上样孔格式最适合容纳你的样品量。

  做这个实验的时,我同一批次提取的蛋白,胶跑出的条带都不一致,这是什么原因呢?

  我做WB也不算是新手,自己觉得整个过程也没有什么明显的问题,可是最后发光的时候内参整个是晕开的,分子还连成了一条线,之前没出现过这种情况,所以想请大家帮忙分析下,是胶的问题,蛋白的问题,还是什么别的,谢啦!

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